1.是终止反应；
2.是使提高显色的稳定性，方便检测，加入硫终止后显色稳定，退色慢！不加终止液2小时内TMB就退色了！；
蓝色TMB在450nm有**吸收峰，但较低，加入酸后TMB变成黄色，在450nm的时候具有**高吸收波峰，峰值比蓝色要高得多，所以常用这个硫酸来终止！一般来说HRP-TMB显色体系里面使用的是2N硫酸，加碱后变成无色。
以底物为TMB为例，当加入过氧化氢脲溶液和TMB时，在HRP酶的作用下，产生蓝色的阳离子根；加入终止液后，一方面，硫酸破坏了HRP酶的活性，使酶的催化功能丧失，另一方面，pH降低，即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌，联苯醌在波长450nm处有**消光系数，所以ELISA实验后，都选用酶标仪在450nm波长下进行测定。